يتطلب إعادة تشكيل IGF des (عامل النمو الشبيه بالأنسولين 1 DES ، وهو شكل مقطوع يفتقر إلى الأحماض الأمينية الثلاثة الأولى) التعامل الدقيق للحفاظ على الاستقرار والفاعلية . أدناه دليل خطوة بخطوة:
المواد اللازمة
● مجفف بالتجميد IGF des Vial
● مذيب معقم (e . g . ،حمض الأسيتيك 10 مم، الماء البكتيري مع 0.1 ٪ BSA ، أو الماء المعقم لاستخدام البحوث)
● محاقن وإبر معقمة (e . g . ، 1–3 ml alminge ، 25-30 needle)
● مناديل الكحول
خطوات إعادة البناء
1. قم بإعداد المذيب
○ الاستخدامحمض الأسيتيك 10 مم(PH 3–4) للذوبان الأمثل والاستقرار . بدلاً من ذلك ، يمكن أن تقلل المياه البكتيرية مع 0. 1 ٪ BSA إلى الأسطح . تجنب الماء العادي إذا كان الببتيد عرضة للتجميع.
2. حساب التركيز
○ حدد التركيز المطلوب (e . g . ، 1 mg/ml) . للحصول على قارورة 1 ملغ ، أضف 1 مل من المذيبات . ملغ/مل).
3. تعقيم وحقن المذيبات
○ امسح سدادة مطاطية القارورة مع الكحول .
○ ارسم المذيب إلى محقنة ، ثم حقنه بلطف على طول الجدار الداخلي للقرار لتجنب الرغوة أو التحريض .لاهز .
4. حل الببتيد
○ دوامة بلطف أو لف القارورة حتى يذوب المسحوق بالكامل . تجنب الانضمام أو الخلط القوي .
5. التخزين
○الحل المعاد تشكيله: تخزين في2-8 درجة(مبرد) للاستخدام على المدى القصير (عادة ما يكون 1-2 أسابيع) . للتخزين على المدى الطويل ، قسامة في أحجام أصغر وتجميدها في-20 درجة(تجنب دورات الجليد المتكررة) .
○قارورة غير مألوفة: الحفاظ على مسحوق مجفف بالتجميد في-20 درجةأو Lower .
اعتبارات رئيسية
○العقم: استخدام تقنيات العقيم لمنع التلوث .
○بروتينات الناقل: BSA (0 . 1 ٪) يمكن أن يقلل من فقد الببتيد عبر الامتزاز ولكن قد يتداخل مع بعض المقايسات (تأكيد التوافق).
○المذيبات الحمضية: 10 مم حمض الأسيتيك يعزز الاستقرار لبعض متغيرات IGF .
○يتجنب: اهتزاز ، درجة الحموضة المتطرفة ، أو درجات حرارة عالية .
ملاحظات السلامة
○للبحث استخدم فقط: لم تتم الموافقة على IGF DES للاستهلاك البشري . مقبضًا في الامتثال لبروتوكولات سلامة المختبر .
○استشر الوثائق: ارجع إلى إرشادات الشركة المصنعة للحصول على تعليمات محددة .
○تصرف: اتبع لوائح نفايات Biohazard .
باتباع هذه الخطوات ، يمكنك ضمان إعادة التكوين المناسبة والحفاظ على سلامة IGF des للاستخدام التجريبي .
